小鼠II型肺泡上皮細(xì)胞是肺上皮細(xì)胞的重要組成部分，體積小，呈立方體形，覆蓋約5%的肺泡表面，占肺泡上皮細(xì)胞的60%，占所有肺細(xì)胞的14~15%。
具有合成和分泌表面活性物質(zhì)、參與免疫反應(yīng)以及轉(zhuǎn)分化等多種功能，在肺發(fā)育和損傷修復(fù)過(guò)程中具有重要作用。
小鼠II型肺泡上皮細(xì)胞的分離
雌雄鼠按2:1合籠交配，次日清晨檢查雌鼠陰道有無(wú)陰栓，有陰栓者確定為妊娠。孕D19（預(yù)產(chǎn)期為D22）時(shí)，在無(wú)菌條件下，剖宮取出胎鼠。
將胎鼠移入超凈臺(tái)，從胸部橫斷胎鼠，小心取出雙肺置于預(yù)冷的PBS液中，盡可能除凈殘留的氣管組織和結(jié)締組織等非肺組織，PBS液清洗2~3次，用鋒利眼科剪將肺組織剪為1mm3左右大小的組織碎塊，用0.25%胰酶（含0.01%DnaseⅠ）溶液清洗1次，然后繼續(xù)用0.25%胰酶（含0.01%DnaseⅠ）溶液于37℃攪動(dòng)消化10~20min。
用等量10%FBS的DMEM/F12（*培養(yǎng)基）終止消化，200目篩網(wǎng)過(guò)濾后，1500r/min低溫離心5min，去上清，收集沉淀，0.1%Ⅰ型膠原酶37℃，5%CO2孵箱內(nèi)消化10~20min。
終止消化仍用等量含10%FBS的DMEM/F12，1000r/min離心5min，收集細(xì)胞沉淀。
原代培養(yǎng)的小鼠II型肺泡上皮細(xì)胞體積較大，形態(tài)較規(guī)則，鏡下可見(jiàn)黑色顆粒狀特征性的嗜鋨小體（即板層體），數(shù)量不等，細(xì)胞膜上有明顯的微絨毛。
更新時(shí)間：2022-09-21
點(diǎn)擊次數(shù)：1522
當(dāng)前位置：
